与基因敲除或蛋白突变相比，细胞内蛋白质的短暂降解通常会引起一种完全不同的表型。HaloPROTAC-3是HaloTag^®标签与PROTAC的融合小分子，是了解和表征蛋白质降解表型的一种快速高效的方法。

HaloPROTAC-3将内源性VHL E3连接酶组分引入HaloTag^®融合蛋白，通过蛋白酶体途径实现泛素化降解。HaloPROTAC包含一个诱导降解的酰胺部分，通过可变长度的连接物与氯化烷烃结合。

为了研究相关细胞背景下的内源性蛋白减少，我们建议通过CRISPR/Cas9基因编辑技术将HaloTag^®或HiBiT-HaloTag^®标签整合到靶标蛋白位点。使用HaloTag^®单克隆抗体(用于HaloTag^®标签)或活细胞发光法(使用HiBiT-HaloTag^®标签) 监测HaloPROTAC-3处理的细胞中蛋白质的减少情况。HaloPROTAC-3显示了内源性标记的HaloTag^®融合蛋白随着时间的推移而持续的快速降低。

上图. HiBiT-BRD4降解机制。内源性标记HiBiT和HaloTag^®标签的BRD4，通过HaloPROTAC浓度的增加发生降解，并使用HiBiT发光检测进行定量。