-
Antibody-drug conjugate
ADC药物研发
-
利用我们专为支持ADC开发各个阶段而定制的一系列技术，增强您的抗体药物偶联物(ADC)研究。从概念探索的早期阶段到详细的体外效力评估，我们的工具旨在提供推动您研究的重要见解。通过先进的磁珠上纯化和偶联工艺简化您的工作流程，深入了解内吞效率的细节，并准确评估您的ADC的功能性和特异性。
内吞作用
| pH反应性染料使ADC研究人员能够精确追踪抗体进入细胞的内吞过程。这些染料在酸性条件下如内吞体和溶酶体中发出荧光，提供了ADC传递效率的定量测量。这有助于评估和增强ADC的治疗潜力。参见这篇已发表文章中的更多数据：使用pH传感器荧光染料的均相微孔板模式抗体内吞测定法 |  曲妥珠单抗(anti-HER2)被pHAb染料进行了标记。 SKBR3细胞经30nM的曲妥珠单抗-pHAb染料处理。 每隔60分钟拍摄一张图像。 |
Fc受体表征
理解Fc受体(FcR)的相互作用对于ADC开发至关重要，直接影响其作用机制及免疫系统的参与。这种表征对于通过抗体依赖的细胞介导的细胞毒性(ADCC)、抗体依赖的细胞介导的吞噬作用(ADCP)和补体依赖的细胞毒性(CDC)优化ADC疗效至关重要，塑造了这些先进治疗方法的安全性和治疗特性。
1. ADCC与ADCP
ADCC涉及免疫细胞靶向并摧毁被抗体包覆的细胞，而ADCP指的是靶细胞被吞噬细胞吞噬和消化的过程。我们的Fc效应活性生物测定法特别设计用于量化这些Fc效应功能的效力，为研究人员提供指导ADC开发的关键数据。
FcγRI ADCP报告基因生物测定的示意图。该生物测定包括一个基因工程改造的细胞系（FcγRI效应细胞）、一个表达抗原的目标细胞和一个特定抗原的抗体。当所有组分共培养时，抗体同时结合目标细胞抗原和效应细胞表面的FcγRI受体。这导致受体聚集、细胞内信号传导和萤光素酶活性。
使用ADCC和ADCP报告基因生物测定法测量ADC的Fc效应活性
曲妥珠单抗（针对HER2的单克隆抗体）、曲妥珠单抗emtansine（由曲妥珠单抗与细胞毒药物emtansine连接而成）或曲妥珠单抗deruxtecan（将曲妥珠单抗与拓扑异构酶I抑制剂deruxtecan 连接）进行系列稀释，然后在37°C下与ADCC生物测定效应细胞（左图）或ADCP生物测定（THP-1）效应细胞（右图）以及SKOV3或SKOV3/HER2敲除目标细胞共培养6小时，具体如图例所示。
测量不同亚型Fc受体的结合
Lumit® FcγR结合免疫测定是一种新颖的均相（无需洗涤）竞争性测定方法，用于测量人Fc受体与抗体或Fc融合蛋白之间的相互作用。
2. CDC
CDC（补体依赖性细胞毒性）利用了免疫系统摧毁肿瘤细胞的能力。CytoTox-Glo™细胞毒性测定提供了一种强大的方法来量化由CDC介导的细胞杀伤作用，为ADC激活补体途径以实现针对性癌细胞清除的潜力提供了宝贵洞见。
Daudi细胞在含有12.5%人血清（作为补体来源）的RPMI 1640中经利妥昔单抗处理。2小时后，使用CytoTox-Glo™ Assay在Glomax® Discover系统上测定CDC活性。
细胞杀伤检测系统
分析您的ADC分子的旁观者杀伤效应和特异性对于优化治疗效果和最小化脱靶效应至关重要。这一评估确保ADC不仅能靶向并消除患病细胞，还能评估其对周围健康组织的影响。我们的HiBiT靶细胞杀伤生物测定法使您能够在混合培养中观察特定类型细胞的死亡。
HiBiT TCK生物测定的原理。细胞毒性mAbs和/或效应细胞与表达HiBiT融合蛋白的目标细胞一起孵育。当目标细胞被杀死时，HiBiT融合蛋白被释放并结合细胞外的LgBiT，形成具有功能的NanoBiT®萤光素酶。使用萤光素酶底物和GloMax® Discover系统测量发光。