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检测萤光素酶反应结果时是否需要选择检测波长？

相关产品目录号：E1910,E1501,E2920,N1110,G7570,G8090

产品分类：萤光素酶报告基因技术及应用

问题类型：操作答疑

产品关键词：萤光素酶报告基因检测，仪器设置

-- 未解决，联系技术支持

萤光素酶检测不需要选择检测波长的原因：

发光反应的检测指标并不来自样品本身。发光反应中检测的光信号，是作为反应的副产物产生的。在萤光素酶反应中（生物发光反应），萤光素酶（例如萤火虫萤光素酶，海肾萤光素酶或者NanoLuc®萤光素酶）催化底物转化为产物，反应中的一部分能量，以光的形式释放。我们检测中用到的样品，通常是真核生物来源的细胞、组织等等。


由于大多数真核生物不发光，通常来说，来自样品自身的背景光非常低。这意味着，在萤光素酶检测中不需要滤除来自样品的任何光。萤光素酶反应的确会在某个特定波长下有最大的发光强度，但是萤光素酶反应的发光光谱通常都相当宽，在许多波长下都有发光。因此，如果只选择在最大波长处检测发光，过滤掉其他发光信号，意味着检测会丢掉很多信号，丢失灵敏度。所以，实际上大多数发光检测仪器会在检测发光反应时收集整个可见光谱（大约为380–780 nm）中的所有光。这可以确保在检测背景值低的同时有非常好的灵敏度。