在选择萤光素酶底物之前，首先需选定使用何种萤光素酶，再选择对应的底物。Promega提供的萤光素酶活体成像底物及其特点如下：

1. 萤火虫萤光素酶活体成像底物：

• VivoGlo™ Luciferin, In Vivo Grade (P1041/P1042/P1043)：萤光素钾盐，活体成像级，经内毒素检测质控。钾盐的溶解度低于钠盐，但在实际使用中，配制方法和性能与钠盐并无明显差异。钾盐在活体成像检测中应用更普遍。
• Luciferin-EF™Endotoxin-Free Luciferin Na (E6551/E6552)：萤光素钠盐，活体成像级，经内毒素检测质控。

2. 海肾萤光素酶活体成像底物：

• EnduRen™ in vivo Renilla Luciferase Substrate (P1111/P1112)：经改造的腔肠素类（coelenterazine）化合物，带有保护性的氧化基团，可减少底物的降解和自发光。与天然的腔肠素底物相比，EnduRen™底物产生的信号更持久。
• ViviRen™in vivo Renilla Luciferase Substrate (P1231/P1232)：经改造的腔肠素类化合物，带有保护性的氧化基团，可减少底物的降解和自发光。与天然的腔肠素底物相比，ViviRen™底物具有更强的信号。

3. NanoLuc^®萤光素酶应用于活体成像的底物推荐：
Promega最新推出的Nano-Glo^® Fluorofurimazine In vivoSubstrate(FFz)是专做活体成像的最优底物，专门开发的用于小动物活体内检测 NanoLuc^® 萤光素酶、NanoLuc^® 融合蛋白或重组 NanoBiT^® 萤光素酶。这种经过优化的水溶性的体内检测试剂提高了底物的生物利用率，可产生明亮、稳定的光信号，并提供灵活的递送选择，其处理要求与体内工作流程兼容。