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常见问题

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萤光素酶检测需要使用什么检测板?

相关产品目录号:E1910,E1501,E2920,N1110,G7570,G8090

产品分类:萤光素酶报告基因技术及应用

问题类型:产品选择指导

产品关键词:

实验室常用的检测板有几类:

l  全透明板(Clear plates)

l  全白色不透光平板(White Plates, Solid Bottom)

l  白色侧壁透明底的平板(White Plates, Clear Bottom)

l  全黑色不透光平板(Black Plates, Solid Bottom)

l  黑色侧壁透明底的平板(Black Plates, Clear Bottom)


萤光素酶反应(生物发光反应)产生的光来自样品中发生的酶反应,不需要外来的光源激发,而且样品中除了反应产生的光,没有其他光源,背景低。对于发光反应,使用全透明板会有明显的相邻孔之间的信号干扰,不合适。另外四种板都可以避免大部分的孔间相互干扰,理论上都可以使用。相比之下,黑色的板会吸收光信号,降低背景(在发光反应中没有必要),也降低检测的灵敏度,不推荐。如果是使用发光与荧光检测叠加的系统,使用黑板和白板都可以,但黑板的信号会比白板低大约一个数量级。透明底的孔板优势是可以在实验过程中观察培养的细胞,全白板的优势是灵敏度最高而且孔间相互干扰最小。以96孔板为例,常见的实验方案和选择建议如下:


  • 在普通的透明细胞培养板中养细胞,加检测试剂待细胞裂解后,把样品转移到全白检测板中(如Corning #3912),这样的板子价格便宜一些,但需要转板,使操作变复杂且容易引入误差;
  • 在底透明、壁不透光的细胞培养级的白板中培养细胞和检测(如Corning #3903),这样的板子可以方便的观察细胞形态,进行发光检测时可以在板子底部贴一张白纸或白色微孔板封板膜(Microplate Sealer)以降低孔与孔之间光信号的交叉干扰;
  • 在壁和底都不透光的细胞培养级的白板中培养细胞和检测(如Corning #3917),这样的板子无法观察细胞状态,对操作要求比较高。
  • 用于活细胞实时监测的发光反应,需要直接将活细胞接种在细胞培养级别的全白检测板(如Corning #3917)或者白色透明底的平板(如Corning #3903)。


*微孔板封板膜(Microplate Sealer)建议:

Nunc white polyester sealing tape             Catalog Number 235305

USA Scientific Light reflecting film             Catalog Number 2998-6550

Perkin Elmer white seals                           Catalog Number 6005199


更多检测用平板型号推荐:

Plates for Biochemical Assays

96-well White Plates suitable for luminescent biochemical assays (no cells)

Brand

Plate Name

 Catalog Number 

 Color 

 Material 

 Well Shape 

Special Features

Corning

 96 Wells White 

3912

White

PS

Flat

Opaque

Corning

96 Wells White

3600

White

PS

Flat

Opaque

NUNC

96 Wells White

236105

White

PS

Flat

Opaque

NUNC

96 Wells White

265302

White

PS

Flat

Clear Bottom

    PS=Polystyrene

96-well Black Plates suitable for fluorescent biochemical assays (no cells)

Brand

Plate Name

Catalog Number

Color

Material

Well Shape

Special Features

 Corning 

 96 Wells Black 

3915

Black

PS

Flat

Opaque

Corning

96 Wells Black

3650

Black

PS

Flat

Opaque

NUNC

96 Wells Black

237105

Black

PS

Flat

Opaque

NUNC

96 Wells Black

265301

Black

PS

Flat

Clear Bottom

Cell-Based Assays

96-well White TC Plates suitable for luminescent cell-based assays

Brand

Plate Name

Catalog Number

Color

Material

Well Shape

Special Features

Corning

96 Wells White

3917

White

PS

Flat

Opaque, With Lid

Corning

96 Wells White

3903

White

PS

Flat

Clear Bottom

96-well Black TC Plates suitable for fluorescent cell-based assays

Brand

Plate Name

Catalog Number

Color

Material

Well Shape

Special Features

Corning

96 Wells Black

3916

Black

PS

Flat

 Opaque, With Lid 

Corning

96 Wells Black

3904

Black

PS

Flat

Clear Bottom


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