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HaloTag蛋白标签-蛋白标记与分析应用Promega公司的HaloTag®技术,这是一种通过在目标蛋白上添加HaloTag®标签,然后使用特异性配基进行共价结合从而进行蛋白标记和分析的方法。该技术不仅适用于细胞成像、蛋白纯化和互作分析等领域,还能进行蛋白降解的研究,并支持各种实验设计,如活细胞和固定细胞成像、蛋白定位和运输、转位研究以及流式细胞分选等。资料详细说明了HaloTag®表达载体的选择、配基种类及其应用、实验步骤和具体案例分析,突出了HaloTag®技术在蛋白研究中的多功能性和灵活性。通过引入可定制的HaloTag®配基及抗体,研究人员可以根据具体需求设计适合的标记方案,进而开展更深入的蛋白功能研究。此外,还提到利用HaloTag®技术进行的蛋白周转和脉冲追踪研究,展示了该技术在监测蛋白合成与降解方面的潜力。总的来说,HaloTag®技术为生物医学研究提供了一个强有力的工具,尤其对于那些需要高灵敏度和高特异性的蛋白分析项目来说更是如此。
分类:蛋白分析
上传时间:2024年12月20日
资料性质:技术介绍手册
语言:中文
文件大小:1.9M
资料相关产品
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pHTC HaloTag® CMV-neo Vector
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简单的多克隆位点(MCS)质粒
C末端HaloTag®载体
用于传统克隆G7711
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pFC27A-and-pFC27K-HaloTag®-CMV-neo-Flexi®-Vectors
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HaloTag® C末端Flexi®载体用于蛋白编码序列的方向性克隆
在Flexi®载体间进行蛋白编码区域转移,无需重新测序
载体可选抗性氨苄青霉素(A)或卡那霉素(K)G8421,G8431
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pFC14A and pFC14K HaloTag® CMV Flexi® Vectors
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将HaloTag添加到融合的伴侣蛋白的C末端
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G9651,G9661
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pHTN HaloTag® CMV-neo Vector
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多克隆位点(MCS)质粒,用于传统克隆
使用CMV启动子在哺乳动物细胞中实现高水平的组成型蛋白表达
多克隆区域便于克隆
适用于瞬时或稳定基因表达G7721
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pFN28A-and-pFN28K-HaloTag®-CMV-neo-Flexi®-Vectors
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添加N末端标签以在哺乳动物细胞中实现高水平蛋白表达
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G8441,G8451
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pFN21A HaloTag®-CMV-Flexi®-Vector
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将HaloTag®添加到融合的伴侣蛋白的N末端
在哺乳动物细胞中实现组成型蛋白表达
包含CMV即刻-早期增强子/启动子
适用于稳定或瞬时基因表达G2821
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pH6HTN and pH6HTC His6HaloTag® T7 Vectors
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用于大肠杆菌和无细胞蛋白表达的双蛋白融合标签克隆载体
可以选择N-或C-末端融合选项
使用聚组氨酸标签或HaloTag® ORF进行蛋白表达和分析
通过PCR或限制性内切酶消化克隆蛋白编码区G8031,G7971
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pFN29 and pFC30 His6HaloTag® T7 Flexi® Vectors
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HaloTag®-6xHis 双标签细菌表达载体
可在大肠杆菌T7无细胞表达系统中表达蛋白
将HaloTag®技术的蛋白质溶解性和标记优势与Ni-亲和技术的可重复使用性和通量相结合
选择N-或C-末端标签,以及氨苄青霉素或卡那霉素抗性G8321,G8381,G8261,G8331
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Janelia Fluor® HaloTag® Ligands
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Janelia Fluor® HaloTag® Ligands适用于活细胞高分辨率成像和标准共聚焦成像
可进行快速单分子标记
具有高信噪比与特异性
相较于荧光蛋白增强了亮度
冻干配体在细胞培养基或水性缓冲液中可溶
每一份五瓶包装的冻干粉配体产品包含5份1nmol每瓶的小剂量配体GA1110,GA1111,GA1120,GA1121,HT1040,HT1070,HT1060,HT1020,HT1010,HT1110,HT1050,HT1030,HT1100,HT1080,HT1090,CS315102
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HaloTag ® Fluorescent Ligands
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将荧光标签或亲和标签共价连接到膜蛋白或细胞内蛋白
细胞通透性的TMR、Oregon Green®、diAcFAM和香豆素配体可以轻易穿过细胞膜以标记细胞内蛋白
非细胞通透性的标签,如Alexa Fluor® 488和660,现在以新的冻干形式提供
冻干配体可溶于细胞培养基或水性缓冲液中G1002,G1001,G2801,G2802,G8471,G8472,G8281,G8282,G8581,G8582,G8272,G8273,G8591,G8592,G3221,G2991,G8251,G8252,HT1120,HT1130
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HaloTag® Ligand Building Blocks
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使任何带有指定功能团的报告基因、蛋白质或核酸能够与HaloTag®蛋白一起使用
对表达HaloTag®蛋白或蛋白融合体的活细胞或固定细胞成像
分析翻译后修饰
分离蛋白质和蛋白质复合物P1691,P6711,P6741,P6751
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Anti-HaloTag® pAb
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用于检测HaloTag®融合蛋白的多克隆兔抗体
特异性针对HaloTag®蛋白
对大肠杆菌和哺乳动物细胞提取物交叉反应低
供应浓度为1mg/mlG9281
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Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody
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针对HaloTag®蛋白的单克隆抗体
与其他非HaloTag®蛋白交叉反应极小
可通过Western blot检测到低至0.5–1ng的HaloTag®融合蛋白
供应浓度为1mg/mlG9211
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HaloLink™ Resin
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HaloTag®融合蛋白与固体表面的共价、定向结合
共价结合使得可以进行严格的洗涤,从而最小化非特异性背景
快速的结合动力学增强了蛋白质:蛋白质相互作用的检测,使得在低蛋白浓度下也能进行结合
一毫升树脂可以结合超过7毫克的HaloTag®融合蛋白G1912,G1913,G1914,G1915
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HaloTag® Protein Purification System
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与HaloTag®配体一起使用,增强重组蛋白的表达和溶解性
共价、高效和特异性地捕获您感兴趣的蛋白质
克服亲和力标签相关的限制(例如,低表达水平蛋白质的捕获不良,洗涤过程中的蛋白质丢失)
提供样品大小(选择Cat.# G6270)G6270,G6280
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HaloTag® Mammalian Protein Purification System
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从哺乳动物细胞培养物中回收高纯度的重组蛋白,即使在低表达水平下
HaloLink™树脂共价结合>7mg/ml的HaloTag®融合蛋白(比FLAG®高10倍的容量)
易于放大或缩小以获得毫克级以上的蛋白质量
可选择纯化或纯化+检测试剂盒G6795,G6790
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Magne™ HaloTag® Beads
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磁性捕获HaloTag®融合蛋白用于沉淀和纯化
每毫升颗粒可结合≥20毫克的纯化HaloTag®融合蛋白
适用于手动或高通量应用G7281,G7282
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HaloTag® Mammalian Pull-Down Systems
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识别更多生理性相关的蛋白质伴侣
直接从裂解物中快速捕获简单和复杂的蛋白质对
使用相同的载体实现从pull-downs到成像研究G6509,G6591,G6500,G6504
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NanoBRET® PPI Starter Systems
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基于BRET的测定,用于检测活细胞中的蛋白-蛋白相互作用
使用全长蛋白研究蛋白相互作用的诱导和抑制,表达水平符合生理相关性
启动系统提供融合载体、阳性对照和检测试剂,用于构建PPI检测
活细胞检测选项用于终点和动力学分析N1821,N1811
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Flexi® Cloning System
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定向克隆蛋白编码序列
可从多种初始应用中进行选择(例如细菌蛋白、哺乳动物蛋白或无细胞蛋白表达),然后根据需要转移插入片段
高效的插入片段转移意味着可直接使用重组克隆,筛选背景克隆所需时间极少
适用于高通量格式,可用于大型筛选项目C9320,C8640,C8820
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Flexi® Cloning System
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蛋白编码序列的方向性克隆
多种初始应用(例如,细菌蛋白、哺乳动物或无细胞蛋白表达)可以选择,之后还可根据需要转移插入片段到其他应用系统
高效的插入片段转移意味着可以直接使用重组克隆,最小化筛选背景菌落的时间
适用于高通量模式的大型筛选项目C8640,C8820,C9320
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HaloPROTAC3
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HaloTag® 融合蛋白的小分子降解剂
特异性和可控的蛋白质降解
使用HaloTag®荧光配基,通过FACS®分选技术对CRISPR/Cas9 HaloTag®编辑细胞进行特异性富集
通过将HiBiT标签添加到HaloTag®融合蛋白中,可以方便地进行蛋白降解的发光检测GA4110,GA3110
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HaloTag® NanoBRET® 618 Ligand
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基于BRET检测活细胞中蛋白质:蛋白质相互作用
用于NanoBRET®实验中HaloTag®融合蛋白的配体
NanoLuc®发射光(460nm)与NanoBRET®荧光团发射光(618nm)之间有较大的光谱分离G9801
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