HiBiT 标签仅11个氨基酸，非常适合在活细胞水平进行内源性蛋白表达检测，如活细胞水平检测 靶向蛋白降解（TPD）。在将HiBiT标签与目标蛋白融合后（例如通过 CRISPR 介导的基因编辑），需同时表达 LgBiT 蛋白，LgBiT 蛋白以高亲和力与 HiBiT 结合，构成 NanoBiT^® 萤光素酶。相比传统的质粒转染，Promega 发布了新的mRNA递送系统：

ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System 能够更均匀、高效地转染 LgBiT mRNA，更方便快捷地从单个孔中的活细胞中动态地量化HiBiT 标记的蛋白质。

ViaScript™ mRNA Transfection Reagent 是一种新型的非脂质体制剂，旨在以最小的毒性将 mRNA 高效转染到多种细胞系中，为转染细胞中的蛋白表达水平提供了更多的控制，递送系统中已包含mRNA转染试剂和 LgBiT mRNA。

产品特点

HiBiT活细胞动力学检测的优势：

• 方便观察单时间点检测可能遗漏的效应（如钩状效应）；
• 通过连续取样可准确测定关键化合物特性（如蛋白降解/恢复速率），推动治疗药物的发现、筛选和优化；
• 通过同一孔板的连续取样提升实验重复性；
• 无需为每个时间点单独设置孔板，节省时间与试剂。

ViaScript™ LgBiT mRNA 递送系统的【核心优势】：

• 能够在细胞群体中均匀且可调节的表达；
• 提高转染效率且不影响细胞活性；
• 可快速的产生稳定的信号（4小时即可产生信号，信号可稳定48小时以上）。

检测步骤

ViaScript™ LgBiT mRNA 递送系统提供更快且更均匀的 LgBiT 表达，以获得更具代表性和精确的活细胞动力学 HiBiT 检测结果。

应用数据

1.现均匀表达以获得一致和可靠的结果

上图. 一个22Rv1 AR-HiBiT克隆细胞系被用ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统（左）或LgBiT表达载体（右）转染过夜。细胞被用1µM ARV-110 PROTAC（底部）处理6小时以诱导AR的降解，或者用溶剂对照（顶部）处理相同时间。在添加Nano-Glo^®活细胞底物后使用GloMax^® Galaxy细胞成像仪收集图像。

2.观察终点法检测模式可能错过的效应

上图.ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统增强了对HiBiT CRISPR敲入细胞系中活细胞蛋白质水平的定量分析，提供了超越终点测定法的对模型和化合物更深入的理解。如上所述，动力学HiBiT靶向蛋白质降解测定法允许精确测量蛋白质降解速率、识别钩状效应（中间面板箭头所示）以及表征蛋白质恢复情况。

3.更快的获得结果

上图. 使用ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统进行转染后，HiBiT信号比DNA质粒转染后更早达到峰值，使您能够更早开始实验并更快获取数据。

4. 对细胞毒性更小

上图. ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统提供高转染效率且细胞毒性极小，在各种细胞系中的表现优于DNA转染。通过将mRNA转染与HiBiT CRISPR敲入细胞系相结合，您可以在更精确模拟患者生物学的细胞环境中工作，从而获得更具代表性的结果，并推动研究的成功。

产品订购信息